[1]何金芮,王 佳,邓 冲,等. 伤寒沙门菌外膜蛋白 YncD的重组表达、纯化及其免疫保护作用观察[J].免疫学杂志,2020,36(11):951.
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 伤寒沙门菌外膜蛋白 YncD的重组表达、纯化及其免疫保护作用观察()
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《免疫学杂志》[ISSN:1000-8861/CN:51-1332/R]

卷:
36
期数:
2020年11期
页码:
951
栏目:
基础免疫学
出版日期:
2020-11-01

文章信息/Info

作者:
 何金芮王 佳邓 冲
关键词:
 伤寒沙门菌外膜蛋白YncD表达纯化免疫保护
文献标志码:
A
摘要:
 目的 通过基因重组表达方法制备伤寒沙门菌外膜蛋白YncD,观察其免疫保护效果。 方法 通过PCR方法扩增伤寒沙门菌Ty2野生株的外膜蛋白YncD编码基因,构建原核表达载体pET28a-yncD,并测序鉴定。表达载体转入大肠埃希菌BL21,IPTG诱导表达重组蛋白,并通过亲和层析和离子交换柱进行纯化。获得的重组蛋白免疫接种小鼠,以Ty2株进行攻击,观察重组蛋白的免疫保护效果。结果 经DNA测序鉴定,pET28a-yncD原核表达重组载体构建成功,其在原核表达系统中表达量高,产物蛋白相对分子质量约为79 000,与预期相符。表达产物经亲和层析和离子交换柱纯化后,得到高纯度重组YncD蛋白。小鼠经重组YncD免疫接种后,可抵抗致死剂量的毒株攻击。结论 成功构建伤寒沙门菌外膜蛋白YncD基因重组原核表达系统,并获得高纯度重组YncD蛋白,动物实验初步显示重组蛋白具有良好的免疫保护作用,为进一步的免疫保护效能评价奠定基础。

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更新日期/Last Update: 2020-11-02